产品概述
【产品介绍】
本产品采用耐热型Taq酶和少量pfu DNA聚合酶、优化的增强剂及稳定剂系统,使得其广泛适用
于以基因组DNA、cDNA及菌落作为模板的PCR,也适用于检测痕量的DNA。本产品的扩增效率
较常规Taq酶高10倍,对长片段的扩增能力明显优于普通PCR,可以用于扩增10Kbp的片段。
【产品特点】
1.具有极高灵敏度和特异性,用0.0035PgDNA可以扩增出单一条带;
2.对高GC样本有非常好的适应性;
3.所得产物末端带A,可以用于AT克隆实验;
4.预添加染料,反应结束可以直接用于电泳凝胶纯化方法。
【试剂盒组成】
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Component
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HC0863
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2xSuper PCR Mix
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1mlx5
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使用方法(按照下表混合反应液):
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Component
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Volume
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2xSuper PCR Mix
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10μl
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前引物(10 μM)
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0.4-1μl
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后引物(10 μM)
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0.4-1μl
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模版
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1-5μl
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ddH2O
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加到20μl
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扩增条件:
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95℃,3min
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95℃,10S
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25-35 cycles
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60℃,15S
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72℃,1K-2K/min
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72℃,5-10min
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【注意事项】
1.用于短片段扩增的引物长度在20个碱基左右,理论Tm值在50℃到60℃之间,一对引物的有效
序列部分理论Tm值相差不宜超过5℃;
2.用于扩增长片段的引物长度可以设计在33bp左右,可以有效提高产品的得率;
3.退火温度可设定为比引物Tm温度低5℃的温度值,如果不能获得目的条带或出现杂带时可以
增减温度以获得更好的扩增效率;
4.为避免引物在预变性升温过程中与模版的非特异性结合,可以在PCR仪温度超过预计退火温度
后再放入PCR反应体系;
5.长片段扩增的时候,扩增时间是影响得率的重要因素。将扩增速度换算成1.5K/min,延长延
伸时间,可有效提高长片段的产物的得率。
注意:本试剂只用于快速鉴定,不可用于测序,产生突变概不负责。
【声明】
仅用于科研使用,不能用于临床诊断和治疗。