鼠尾鉴定试剂盒
HC0862
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HC0862 100T ¥300.00
规格参数
鼠尾鉴定试剂盒
WILBER
100T
产品概述

【产品介绍】

本试剂盒采用独特的裂解液及终止液(含PCR增强剂),所得产物不受细胞释放PCR抑制剂影响可

以直接用于扩增产物不超过500p的PCR扩增。可用于小鼠转基因定性分析及突变定性分析。

适用范围

初生一周龄仔鼠尾或耳朵

 

产品组分

Component

HC0862

MT DNAex LB1裂解液

4x1ml

MT DNAex DB2 终止液

4x1ml

2×Super PCR Mix

1ml

 

 

 

 

 

适用范围

初生一周龄仔鼠尾或耳朵

 

【操作步骤】

1.取0.2-0.3cm长的初生一周龄仔鼠尾,放到1.5ml的EP管,用研磨棒或枪头送入离心管底部,加入

40μI MT DNAex LB1,用研磨棒或枪头进行研磨(1min左右即可,研磨标准是液体明显浑浊,无需

整个组织全部破碎);

2.沿着研磨棒或枪头壁加入40u MTDNAex DB2,并用研磨棒或枪头将其混匀;

3.吸取5ul产物,放入新的1.5ml离心管中,并加入25ul ddH2O,混匀,产物可以直接用于PCR扩增。

:研磨棒用5%次氯酸钠浸泡30min可以完全去除DNA污染;枪头可使用蓝枪头。

 

如果需要更好的效果可参考以下方案:

1.取0.2-0.3cm长的初生一周龄仔鼠尾,放到1.5ml的EP管,用研磨棒或枪头送入离心管底部,加入

40μl MT DNAexLB1,用研磨棒或枪头进行研磨后,金属浴95°C处理10min;

2.沿着研磨棒或枪头壁加入40uI MTDNAex DB2,并用研磨棒或枪头将其混匀,12000rpm,离心

5min后取上清备用;

                3.吸取5ul上清,放入新的1.5ml离心管中,并加入25ul ddH20,混匀,产物可以直接用于PCR扩增。

推荐PCR反应体系:

Component

Volume (μl)

产物

2

2×SuperPCR Mix

10

前引物(10μM)

0.5

后引物(10μM)

0.5

ddH2O

7

 

扩散条件:

90℃,10s

 

35 cycles

56℃,15s

72℃,15s

4℃,∞

 

 

3.产物经稀释后可立即用于PCR或qPCR反应,或在-20°C保存,并在半年内使用;

长期存放建议分装后在-70°C保存。cDNA应避免反复冻融。

 

注意事项

1.本产品试验结果仅用于定性分析,不建议用于定量分析试验;

2.本产品减少DNA提取步骤,可以有效预防DNA污染的发生,但不能完全避免DNA的污染,如果需

要更可靠的结果,请于生物安全柜中完成DNA提取及PCR预混过程;

3.MT DNAex LB1和MT DNAex DB2如果长期不用可以保存到-20°℃;

4.MT DNAex LB1如果出现沉淀, 可以40°C孵育5min溶解,不影响效率。

5.为保证良好的检测效率,请将目的片段设计在500bp以内且质量好的引物。

 

【声明】

仅用于科研使用,不能用于临床诊断和治疗

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